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支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物能用于實(shí)驗(yàn)嗎2024-06-03 16:14
支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物不能用于實(shí)驗(yàn)。以下是詳細(xì)的解釋和歸納: 支原體污染對(duì)細(xì)胞的影響: 支原體污染會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、形態(tài)改變,甚至引起細(xì)胞死亡。 支原體可以大量消耗培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)和細(xì)胞代謝的基礎(chǔ)成分,如核酸前體、氨基酸、維生素、脂質(zhì)、膽固醇等,導(dǎo)致細(xì)胞增殖緩慢及各種代謝、功能紊亂甚至喪失。 支原體還會(huì)吸附在細(xì)胞表面,破壞細(xì)胞膜的完整性,更有少數(shù)類(lèi)型支原體可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),如發(fā)酵支原體、生殖支原體和肺炎支原體。 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響: 被支原體污染的細(xì)胞無(wú)法用于得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 支原體污染會(huì)干擾細(xì)胞的代謝過(guò)程,影響細(xì)胞的功能和表達(dá),從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和解讀。 支原體還可能作為外源性因素,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生潛在的干擾,使研究者難以區(qū)分細(xì)胞的內(nèi)在變化與外界因素的影響。 檢測(cè)支原體污染: 支原體污染在普通光學(xué)顯微鏡下難以被發(fā)現(xiàn),細(xì)胞被污染早期不會(huì)表現(xiàn)出明顯的“癥狀”。 目前常用的檢測(cè)方法有:DNA染色法、支原體培養(yǎng)法、PCR法(包括凝膠電泳和熒光定量)、化學(xué)發(fā)光法等。但需要注意的是,這些方法雖然可靠,但實(shí)驗(yàn)周期可能較長(zhǎng)。 綜上所述,支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物不能用于實(shí)驗(yàn),因?yàn)橹гw污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝和功能,進(jìn)而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。因此,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要采取一系列預(yù)防措施來(lái)避免支原體污染,如加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒工作、選擇質(zhì)量可靠的培養(yǎng)基和血清等培養(yǎng)材料、實(shí)驗(yàn)操作人員嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)范等。如果懷疑細(xì)胞培養(yǎng)物被支原體污染,應(yīng)立即進(jìn)行檢測(cè)并采取相應(yīng)的處理措施。
對(duì)于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞(如已轉(zhuǎn)染,或經(jīng)過(guò)體外刺激),如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染,但此細(xì)胞又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng),推薦使用MB公司生產(chǎn)的復(fù)合抗生素Zell Shield?。 細(xì)胞祛除支原體試劑Zell Shield使用方法: (1)在每次使用Zell Shield?之前,細(xì)胞傳代時(shí),先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細(xì)胞,再使用加了Zell Shield?的培養(yǎng)基養(yǎng)細(xì)胞,能達(dá)到更好的祛除支原體的效果(“懸浮沖洗法”的詳細(xì)步驟,見(jiàn)下文)。 (2)Zell Shield?常規(guī)為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時(shí)按需融化配制。避免反復(fù)凍融。 (3)Zell Shield?按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如:500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield?,50mL/瓶的Zell Shield?可供5L培養(yǎng)基使用。 北京締一生物科技有限公司國(guó)內(nèi)總代Ausbian品牌,德國(guó)Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)使用的Ausbian澳洲進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,新生牛血清,干細(xì)胞培養(yǎng)基,馬血清,德國(guó)MB支原體檢測(cè)/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問(wèn)締一生物官網(wǎng):www.dyshengwu.com。聯(lián)系電話:4006661688。
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