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細胞支原體清除劑怎么用?

2024-03-18 15:33
文章附圖

細胞支原體清除劑是細胞培養(yǎng)過程中常用產(chǎn)品,由于支原體污染影響細胞的狀態(tài),造勢實驗結(jié)果可信度降低、可重復(fù)性差等問題。那細胞支原體清除劑如何使用呢?

zellshield.jpg

細胞支原體清除劑Zell Shield-18℃避光保存。使用前,建議融化分裝。避免反復(fù)凍融。Zell Shield1:100直接加入到新鮮配制的培養(yǎng)基。例如:500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield,混合后在2~8℃保存可至少4周。37℃進行培養(yǎng)時,最多7天需要更換新的含有Zell Shield的培養(yǎng)基,以獲得良好的保護。

此外需要注意的是,細胞支原體去除劑Zell Shield在培養(yǎng)基過濾前或過濾后加均可。如果培養(yǎng)基尚未無菌過濾,可在加入Zellshield后再進行無菌過濾。

一般情況下,使用了Zell Shield,就不必再額外添加雙抗了。

細胞支原體清除劑Zell Shield適合如下兩種情況:

1)培養(yǎng)的細胞面臨支原體的高污染風險,尤其是取自生物有機體的原代細胞。這時建議在培養(yǎng)基中加1%Zell Shield

2)發(fā)現(xiàn)細胞已被支原體污染,而不愿意丟棄(如已轉(zhuǎn)染,已經(jīng)體外刺激或已費力擴增的細胞),希望繼續(xù)培養(yǎng),這時可采用下面的懸浮沖洗法進行支原體的祛除。

對于非常珍貴的細胞或不易獲得的生物樣品(如細胞種子),發(fā)現(xiàn)有支原體污染,希望挽救。這時我們推薦使用MB公司的MynoxMynox Gold進行支原體的祛除。

細胞支原體清除劑Zell Shield使用方法:

(1)在每次使用Zell Shield?之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的懸浮沖洗法處理好細胞,再使用加了Zell Shield?的培養(yǎng)基養(yǎng)細胞,能達到更好的祛除支原體的效果(懸浮沖洗法的詳細步驟,見下文)。

(2Zell Shield?常規(guī)為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時按需融化配制。避免反復(fù)凍融。

(3Zell Shield?1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如:500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield?50mL/瓶的Zell Shield?可供5L培養(yǎng)基使用。


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