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祛除細(xì)胞支原體污染的一種方法2020-07-31 13:21來源:威正翔禹|締一生物
細(xì)胞培養(yǎng)中,很容易發(fā)生支原體污染,而常見的青鏈霉素等大多數(shù)的抗生素對支原體又無效。因此選對一款有效且無需長期使用的支原體祛除劑,對于挽救污染細(xì)胞可以起到?jīng)Q定性作用。 以往發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞中存在支原體污染時(shí),應(yīng)立即終止實(shí)驗(yàn),全部丟掉被污染的細(xì)胞,以避免支原體污染的擴(kuò)散。而對于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞(如已轉(zhuǎn)染,或經(jīng)過體外刺激),如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染,但此細(xì)胞又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng),又怎么辦呢? 這里向您推薦祛除細(xì)胞支原體污染的一種方法,其中要用到德國MB公司生產(chǎn)的**復(fù)合抗生素Zell Shield?。 Zell Shield?特點(diǎn) 1) 高效廣譜 Zell Shield?通過同時(shí)阻止支原體、霉菌、酵母、細(xì)菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。 2) 安全 無細(xì)胞毒性,**復(fù)合支原體敏感抗生素,對大多數(shù)細(xì)胞株無毒。 3) 活性穩(wěn)定 在細(xì)胞培養(yǎng)期間,Zell Shield?始終保持穩(wěn)定的活性。 4) 使用方便 Zell Shield?為無菌溶液,可直接加入培養(yǎng)基使用。 二、懸浮沖洗法 + Zell Shield?祛除支原體污染 據(jù)研究表明,約98%的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。支原體直徑約180~350nm,比細(xì)胞小很多,經(jīng)低速離心可與細(xì)胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗細(xì)胞、離心,加上使用Zell Shield?,即可在細(xì)胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。 具體流程如下圖: 要點(diǎn)歸納: 1. 每次傳代時(shí),重復(fù)三次對細(xì)胞懸浮沖洗步驟非常重要,操作要正確、規(guī)范,以達(dá)**效果! 2. 在培養(yǎng)基中加入1%Zell Shield?,抑制支原體增殖! 3. 使用安全的血清、培養(yǎng)基等試劑,不再有新的支原體加入! 只要如法操作,即傳代時(shí)懸浮沖洗,并且用含Zell Shield?的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞四代后,細(xì)胞中的支原體即可祛除。希望以上方法能給你帶來幫助。 下一篇: 論牛血清外源因子的檢查
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