THP-4培養(yǎng)基 4升培養(yǎng)基配制方法
包裝 每一個(gè)獨(dú)立包裝的THP 培養(yǎng)基均包括5個(gè)小瓶的液體。 碳酸氫鈉和谷氨酰胺需分別加入。_____________________________________________________________________保存 -20°C凍存為**保存狀態(tài)。_____________________________________________________________________準(zhǔn)備 待小瓶中的液體完全融化后,劇烈搖晃小瓶,使瓶中的液體均勻。配制培養(yǎng)基時(shí),
1. 量出3升常溫的雙蒸水或純凈的組織培養(yǎng)水,并加入到攪拌容器中。攪拌時(shí),加入小瓶中的液體,并用常溫的雙蒸水或純凈的組織培養(yǎng)水沖洗小瓶,以確保瓶中的液體完全倒入攪拌容器中。
2. 加入1號(hào)和2號(hào)小瓶中的液體,然后,再加入9.0 g的碳酸氫鈉,待其完全溶解后,再進(jìn)行下列操作。 建議加入谷氨酰胺的濃度為4mM (即:4升培養(yǎng)基中需加入谷氨酰胺2.3g)。注意:如培養(yǎng)基中谷氨酰胺的水平過高,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞有毒代謝物的生成。
3. 加入3號(hào)、4號(hào)和5號(hào)小瓶中的液體,并用水量來調(diào)節(jié)最后的培養(yǎng)基體積。不必再調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值。 (培養(yǎng)基已經(jīng)含MOPS緩沖液)!
4. 過濾除菌后,將配制好的培養(yǎng)基置于4-8°C冰箱中避光冷藏。
注意:已過濾除菌且不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基配制后的有效期為9個(gè)月。不要在大容器中保存少量的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基需避光保存。
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