HiMedia產(chǎn)品解疑
(使用脫水培養(yǎng)基經(jīng)常遇到的問題)
問題
可能的原因
建議
pH值不對
1.過熱
2.滅菌時間太長
3.使用了堿性玻璃,容器內(nèi)有殘留或水不純
4.反復(fù)熔化,導(dǎo)致成分水解
5.在高溫下保存太久
6.在25℃以上測量的pH值
7.蒸餾水的初始pH值有問題
1.XLD瓊脂(M031)標(biāo)準(zhǔn)顏色——紅色透明
2.蒸餾水呈酸性pH值,使得XLD瓊脂呈現(xiàn)霧狀。
1.不要過熱。
2.滅菌應(yīng)按規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行。
3.檢查玻璃器皿的pH值。
4.僅取所需數(shù)量的培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)溶,并避免多次重熔。避免準(zhǔn)備過量的培養(yǎng)基。
5.將培養(yǎng)基存放在干燥通風(fēng)的室內(nèi),避免極端的溫度。
6.含有碳水化合物的培養(yǎng)基過熱,會導(dǎo)致pH值急劇變化
7.蒸餾水的pH值應(yīng)在6.0-7.0之間。
因此,應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定進(jìn)行滅菌。對于含有額外添加碳水化合物的培養(yǎng)基,應(yīng)將培養(yǎng)基和碳水化合物分別滅菌再混勻。
不完全溶解
1.加熱不充分,缺少攪拌
2.在25℃以上測量的pH值
3.用的容器太小(偶爾有些培養(yǎng)基自身即帶沉淀,如BS瓊脂)
4.容器有殘留或使用了堿性玻璃
1.滅菌前煮沸培養(yǎng)基。
2.檢查蒸餾水的pH值。pH值應(yīng)在6.0-7.0之間
3.使用足夠大的容器。
4.檢查玻璃器皿的pH值。
培養(yǎng)基變暗
1.培養(yǎng)基過度加熱
2.培養(yǎng)基稱重不正確,過量
3.不正確的pH值
4. 反復(fù)熔化
5.培養(yǎng)基過期或變質(zhì)
2.不要加入過量的干粉。按照克/升復(fù)溶干粉。
3.檢查蒸餾水的pH值,應(yīng)為6.0-7.0
4.避免再熔和再制備培養(yǎng)基。
5.在有效期內(nèi)使用培養(yǎng)基。
凝膠變軟
1.瓊脂沒在溶液中,脫水培養(yǎng)基沒完全復(fù)溶
2.瓊脂發(fā)生酸水解
3.加入接種液導(dǎo)致瓊脂稀釋,而未能補(bǔ)足。
1.檢查蒸餾水的pH值。 蒸餾水的pH應(yīng)該介于6.0-7.0之間。
2.蒸餾水的酸性pH導(dǎo)致瓊脂水解,溶解不完全。
3.嚴(yán)格按照規(guī)定的說明進(jìn)行滅菌。避免過度滅菌,這可能導(dǎo)致凝膠變軟。
菌落沒有長出
因為培養(yǎng)基的原因:
1.培養(yǎng)基反復(fù)熔化
2.過度加熱
3.不充分的混勻
4. 因成分稀釋,而未能彌補(bǔ)其鑒別特性
6.使用了不正確的配方
1.避免反復(fù)重熔。在給定時間內(nèi)只復(fù)溶需要量的培養(yǎng)基。
2.不要過熱。
3.確保適當(dāng)?shù)幕靹颉?/span>
4.使用適量的接種菌量。請勿在有效期過后使用菌液制備用培養(yǎng)基。
6.根據(jù)說明書使用規(guī)定量的培養(yǎng)基。
因為增補(bǔ)劑的原因:
1.增補(bǔ)劑過期或變質(zhì)
2.增補(bǔ)劑未很好的復(fù)溶。所加濃度不夠。增補(bǔ)劑添加不正確,如培養(yǎng)基過熱或濃度有誤。
3.增補(bǔ)劑未正確與培養(yǎng)基混勻。
1.在效期內(nèi)使用增補(bǔ)劑。
2.根據(jù)說明書上的規(guī)定,使用規(guī)定量的增補(bǔ)劑,配置為規(guī)定濃度。
3.確保增補(bǔ)劑與培養(yǎng)基正確混勻。
培養(yǎng)基顏色變化(含指示劑的培養(yǎng)基)
培養(yǎng)基pH值在滅菌前后沒有在規(guī)定的范圍內(nèi)
1.檢查用于制備蒸餾水的水的pH值。蒸餾水pH值應(yīng)在6.0-7.0之間。
2.在pH漂移的情況下,可使0.1N Cl/0.1N NaOH調(diào)節(jié)pH。
培養(yǎng)基有沉淀
通常發(fā)生在含無機(jī)鹽的培養(yǎng)基
1.建議使用蒸餾水溶解干粉培養(yǎng)基。也可以使用純凈水。
2.推薦條件之外的培養(yǎng)基過熱或過度滅菌,會導(dǎo)致沉淀。
3.這通常在含有磷酸鹽的培養(yǎng)基上觀察到。應(yīng)該進(jìn)行水的兼容性檢查。
制備好的培養(yǎng)基儲存時變暗
1.培養(yǎng)基含糖濃度高,并被持續(xù)加熱
2.培養(yǎng)基存儲溫度高
1.不要過熱
2.應(yīng)按照推薦的時間和溫度進(jìn)行滅菌
3.避免持續(xù)地熔化
4.避免所配制的培養(yǎng)基長時間暴露于50°C以上的高溫。
流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基中的環(huán)不勻稱或環(huán)發(fā)生扭曲(M009)
1. 瓊脂消化不當(dāng)
2. 沸騰不足
1.高壓前保證瓊脂顆粒的完全消化,以避免出現(xiàn)相分離。
2. 正確消化、高壓和冷卻,不擾動培養(yǎng)基,才會形成密致環(huán)。
制備好的流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(M009)有松弛環(huán)
配制好的培養(yǎng)基的擾動
再加熱和冷卻后,環(huán)可恢復(fù)原來的形狀
在高壓滅菌罐中,流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基有雙環(huán)形成
因為氧氣吸收
確保正確夾緊底部通氣口。如果松動,吸收大氣中的氧氣會導(dǎo)致雙環(huán)形成。
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